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腺病毒包装

腺病毒(Adenovirus, AdV)是一种直径70-90nm、无被膜的20面体结构病毒,具有36 kb的双链DNA基因组。重组腺病毒(rAdV)系统通过将病毒蛋白编码相关的E1和E3去除,结合能够反式互补病毒E1蛋白的293宿主细胞,不仅保留了腺病毒本身高转导效率、高表达水平的优点,同时杜绝了子代病毒的自我复制的风险,降低了免疫原性,是一种优秀的基因传导工具。维洛信基于国际学术界公认的标准流程,使用应用最广的5型腺病毒进行重组腺病毒的生产与包装,并建立了完善的纯化和质控方法,确保满足各种类型的实验研究需求。我们采用新一代AdMax双质粒共转染系统,重组效率高,避免了细菌重组的不确定性,能够得到高滴度、高纯度的病毒颗粒。


重组腺病毒载体优势:

1. 宿主范围广:能够感染分裂期细胞与静止期细胞;对上皮细胞有高度嗜性,尤其适用于感染原代细胞、悬浮细胞等难转染细胞类型
2. 感染效率高:优于其他病毒载体和转染系统的高感染能力,能达到近100%的效率
3. 包装容量大:最高可插入7.5 kb的外源片段
4. 表达水平高:1-2d即开始高水平表达
5. 安全系数高:去除病毒蛋白编码序列,降低细胞毒性和免疫反应;双质粒转染系统,生物安全性高
6. 无整合风险:无插入致突变性


服务流程:

1. 方案沟通
2. 基因克隆:将目的基因(Gene of Interest)或shRNA构建入腺病毒转移质粒,测序验证
3. 病毒包装:AdMax双质粒共转染(转移质粒+病毒包装质粒)入293宿主细胞, 借助Cre/loxP系统生成重组腺病毒颗粒
4. 收毒:短暂孵育后收获病毒液
5. 扩增与纯化:根据客户要求进行病毒扩增;超速离心纯化,超滤浓缩
6. 质量控制:
- 多重酶切质粒鉴定
- qPCR检测病毒滴度
- 病毒颗粒光密度(OD260)

包装服务流程图


交付内容:

定制腺病毒病毒颗粒
对照病毒(可用于转导测试)
详细实验报告


维洛信腺病毒平台:

1. 先进AdMax包装系统与严格制备工艺,力求获取最优滴度、活性、纯度与一致性的腺病毒产品
2. 20余种组织特异性启动子(CMV, mCMV, PGK, CAG等)与多种报告基因(EGFP、mCherry、EYFP等)可供选择,满足您的不同需求
3. 滴度高:维洛信可提供1010~1011 pfu/mL及以上滴度的病毒,满足大部分实验的使用要求
4. 覆盖各种应用:根据您的应用要求,设计各种类型的腺病毒包装,包括过表达、RNAi、miRNA调节、基因敲除、诱导表达等。
5. 灵活生产:我们提供体外应用级别与体内应用级别各种规格的病毒(小规格、中规格、大规格)的制备服务
6. 具有竞争力的价格与货期


针对不同应用方向,我们提供以下腺病毒制备服务:


了解更多腺病毒(AdV)服务,请拨打137-1756-5893咨询我们。

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