慢病毒平台
慢病毒(Lentivirus)是基于人类免疫缺陷1型病毒(HIV-1)构建的基因治疗工具,具有双链RNA基因组,能够广谱感染分裂细胞与非分裂细胞,且能够将外源片段整合入宿主基因组,实现长期、稳定表达。慢病毒系统可以高效感染神经元细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、免疫细胞、干细胞等多种难转染细胞,用于基因过表达、RNA干扰、miRNA相关的细胞和动物试验,尤其适用于稳定细胞株和动物模型的构建,是优秀的基因研究工具。
Fig 1. 第三代慢病毒包装系统示意图
慢病毒优势:
1. 广泛宿主细胞:与逆转录载体不同,能够感染分裂期与静止期细胞;包膜质粒使用疱疹病毒VSVG蛋白,宿主范围更广,包括神经元细胞、肿瘤细胞、心肌细胞、干细胞等多种类型的细胞。
2. 极强感染能力:慢病毒载体具有极高的感染效率,尤其适用于难转染的神经元细胞、干细胞、原代细胞和其他不分化细胞。
3. 长期稳定表达:外源基因整合入基因组,实现持久性表达,可应用于构建稳定细胞系、制备转基因动物等。
4. 低免疫原性:体内实验不易造成非特异性反应与免疫抑制。
5. 高安全系数:尚未发现对人的致病性,已被应用于临床治疗;采用三质粒包装系统,去除致病基因和辅助序列,包装质粒和载体质粒尽量降低同源性,进一步提高了生物安全性。
腺病毒 (Adenovirus) | 慢病毒 (Lentivirus) | 腺相关病毒 (AAV) | |
---|---|---|---|
颗粒大小 | 60-90nm | 90-100 nm | 20-30 nm |
基因组 | dsDNA (38-39kb) | RNA (9kb) | ssDNA (4.7kb) |
包装容量 | 7.5kb | 6kb | 4.5kb |
宿主细胞 | 分裂与非分列细胞 | 分裂与非分裂细胞 | 分裂与非分裂细胞 |
整合方式 | 染色体外附加体 | 随机高频整合 | 染色体外附加体或低频定向整合(2%) |
表达效率 | 高水平表达 | 中~高水平表达 | 高水平表达 |
表达时间 | 1-2d开始表达 < 1个月 |
2-4d开始表达 > 2个月 |
>3d开始表达 > 6个月 |
免疫原性 | 高 | 低 | 极低 |
安全性 | 可能会引起轻微症状 | 暂无发现致病性 | 暂无发现致病性 |
维洛信基于国际学术界公认的标准流程,采用第三代包装系统系统在293T细胞中进行慢病毒的制备,并建立了完善的纯化和质控方法,确保满足各种类型的实验研究需求。
维洛信慢病毒平台:
1. 三代慢病毒包装系统与严格制备工艺,力求获取最优滴度、活性、纯度与一致性的慢病毒产品
2. 多种优化启动子(CMV, mCMV, CAG, PGK, Ubc等)与报告基因(EGFP、mCherry、EYFP等)或药筛基因(Neo, Puro, Hygromycin等)可供选择,满足您的不同需求
3. 滴度高:维洛信可提供108~109 TU/ml及以上滴度的病毒,满足大部分实验的使用要求
4. 覆盖各种应用:维洛信慢病毒平台根据您的应用要求,设计各种类型的慢病毒包装,包括过表达、RNAi、miRNA调节、基因敲除、诱导表达(Tet-on系统)等。
5. 灵活生产:我们提供体外应用级别与体内应用级别各种规格的病毒(小规格、中规格、大规格)的制备服务
6. 具有竞争力的价格与货期
针对不同应用方向,我们提供以下慢病毒制备服务:
用于基因过表达的慢病毒制备>>
用于RNA干扰的慢病毒制备>>
用于表达/抑制microRNA的慢病毒制备>>
用于基因编辑的慢病毒制备>>
了解更多慢病毒服务,请拨打137-1756-5893咨询我们。